domingo, 8 de octubre de 2017

CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA


FUNDAMENTO



La cromatografía en columna es quizás el método más general, utilizado para la separación, a la vez que para la purificación, de diferentes compuestos orgánicos que se encuentren en estado sólido o líquido.

En este tipo de cromatografía, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente, se coloca en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con una llave para controlar el paso de sustancias al exterior de la columna. La fase estacionaria se impregna con el eluyente o fase móvil. Seguidamente la mezcla orgánica que nos interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase estacionaria, y así la fase móvil podrá ir atravesando el sistema.


          
















1. CLASIFICACIÓN DE LA CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA SEGÚN MECANISMOS DE SEPARACIÓN.

A). CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO

















B). CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN MOLECULAR

   

C). CROMATOGRAFÍA DE AFINIDAD





MÉTODOS DE SEPARCIÓN



SEPARACIÓN DE MEZCLAS


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FILTRACIÓN



DESTILACIÓN


CENTRIFUGACIÓN


     
CROMATOGRAFÍA.- La cromatografía es un método físico de separación en el que los componentes que se han de separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales está en reposo (fase estacionaria, F.E.) mientras que la otra (fase móvil, F.M.) se mueve en una dirección definida.


CROMATOGRAFÍA PLANA O DE SUPERFICIE


         
           





















sábado, 30 de septiembre de 2017

LEY DE LAMBERT-BEER


La ley de BOUGUER-LAMBERT-BEER también se conoce como ley de Beer-Lambert-Bouguer y fue descubierta de formas diferentes e independientes en primer lugar por el matemático y astrónomo francés Pierre Bouguer en 1729´Luego por el filósofo y matemático alemán, Johann Heinrich Lambert en 1760 y por último el físico y matemático también alemán, August Beer en el año 1852. 




     










MANEJO DEL ESPECTROFOTÓMETRO




ESPECTROFOTÓMETROS


Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o espectrofotómetro de masa.

Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:

1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra.
2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestra.
La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lámpara de wolframio (también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón y lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos.
El monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática.
Está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.
Es donde tiene lugar la interacción, R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya absorción ni dispersisón de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, en base a sus leyes de absorción, en lo que concierne al paso de la molécula de fundamental-excitado.
El detector, es quien detecta una radiación y a su vez lo deja en evidencia, para posterior estudio. Hay de dos tipos:

a) los que responden a fotones;
b) los que responden al calor
Convierte el fenómeno físico, en números proporcionales al analito en cuestión.
Fotodetectores
En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes móviles del equipo.

El espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones. También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.
Componentes de un espectrofotómetro:
Cubetas de espectofotometría. En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el trabajo con luz ultravioleta; en segundo plano, de plástico, para colorimetría (es decir, empleando luz visible).
Fuente de luz: 
La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lámpara de wolframio (también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón y lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos.

Monocromador:
El monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática.
Está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.


Compartimiento de Muestra:
Es donde tiene lugar la interacción, R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya absorción ni dispersisón de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, en base a sus leyes de absorción, en lo que concierne al paso de la molécula de fundamental-excitado.
Detector:
El detector, es quien detecta una radiación y a su vez lo deja en evidencia, para posterior estudio. Hay de dos tipos:
a) los que responden a fotones;
b) los que responden al calor
Registrador:
Convierte el fenómeno físico, en números proporcionales al analito en cuestión.
File:Componentes de un espectofotometro.jpg
Material de Apoyo (videos)

ESPECTROS DE ABSORCIÓN


La espectrofotometría es un método científico utilizado para medir cuanta luz absorbe una sustancia química, midiendo la intensidad de la luz cuando un haz luminoso pasa a través de la solución muestra, basándose en la Ley de Beer-Lambert. Esta medición también puede usarse para medir la cantidad de un producto químico conocido en una sustancia.


En la espectrofotometría se aprovecha la absorción de radiación electromagnética en la zona del ultravioleta y visible del espectro. La muestra absorbe parte de la radiación incidente en este espectro y promueve la transición del analito hacia un estado excitado, transmitiendo un haz de menor energía radiante. En esta técnica se mide la cantidad de luz absorbida como función de la longitud de onda utilizada. La absorción de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las moléculas, y es característica de cada sustancia química.

La espectrofotometría ultravioleta-visible utiliza haces de radiación del espectro electromagnético, en el rango UV de 180 a 380 nm, y en el de la luz visible de 380 a 780 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la región ultravioleta y visible del espectro.

Las técnicas colorimétricas se basan en la medida de la absorción de radiación en la zona visible por sustancias coloreadas. En algunas ocasiones, la muestra que deseamos determinar no posee color por sí misma; en tal caso, es preciso llevar a cabo un desarrollo de color empleando reactivos que den lugar a sustancias coloreadas con la muestra que interesa estudiar. La colorimetría y fotocolorimetría no son en realidad técnicas distintas y la diferencia estriba en el tipo de instrumental empleado, de forma que se denomina colorímetro a aquellos aparatos en los que la longitud de onda con la que vamos a trabajar se selecciona por medio de filtros ópticos; en los fotocolorímetros o espectrofotómetros la longitud de onda se selecciona mediante dispositivos mono-cromadores.

Material de apoyo:


















domingo, 17 de septiembre de 2017

ESPECTROSCOPÍA ULTRAVIOLETA-VISIBLE - I

FUNDAMENTOS


La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometría ultravioleta-visible (UV/VIS) es una espectroscopia de emisión de fotones y una espectrofotometría. Utiliza radiación electromagnética (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagnético, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La radiación absorbida por las moléculas desde esta región del espectro provoca transiciones electrónicas que pueden ser cuantificadas.

La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de moléculas, y además, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia.

Se utiliza de manera general en la determinación cuantitativa de los componentes de soluciones de iones de metales de transición y compuestos orgánicos altamente conjugados.

Se utiliza extensivamente en laboratorios de química y bioquímica para determinar pequeñas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o la concentración de cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo.

Las moléculas orgánicas distribuyen sus electrones en diferentes niveles electrónicos llamados orbitales moleculares. Los orbitales moleculares de menor energía son los σ, a continuación siguen los orbitales π. Cuando en la molécula existen átomos con pares electrónicos libres (oxígeno, azufre, nitrógeno, halógenos) tendremos niveles no enlazantes n. Estos niveles electrónicos se disponen en la región enlazante del diagrama. En la región antienlazante nos encontramos con los orbitales moleculares π y σ. Una molécula en su estado fundamental tiene ocupados los orbitales enlazantes y no enlazantes y desocupados los antienlazntes.

De lo comentado anteriormente se deduce que las transiciones electrónicas deben partir de los orbitales enlazantes y no enlazantes terminando en los antienlazantes. Así podemos tener los 5 tipos de transiciones electrónicas que se muestran en el siguiente diagrama.

niveles-transiciones

La transición electrónica más importante suele ser del HOMO (último orbital ocupado) al LUMO (primero orbital vacío) que corresponde al menor salto energético y le corresponde una longitud de onda grande.

En los alcanos solo son posibles transiciones σ→σ (etano: λ=135nm). Estas bandas no pueden ser observadas con los espectrofotómetros comerciales, puesto que hacen barridos a partir de los 200 nm. Sin embargo, las moléculas que presentan dobles enlaces conjugados presentan transiciones π→π que pueden ser observadas (butadieno: λ=217nm).

Cuando en la molécula existen átomos con pares libres, la transción de menor energía(mayor logitud de onda) es n→π. Sin embargo, se trata de una transición poco probable, debido a que no existe solapamiento entre ambor orbitales, originando bandas muy débiles. De este último comentario se deduce la regla de selección de la espectroscopía visible-UV: las transiones n→π están "prohibidas". Entendiéndose por prohibida una transición de baja probabilidad.

Alcanos. Sus bandas de absorción son debidas a transiciones σ→σ de enlaces C-C y C-H. Estas transiciones son de elevada energía y tienen lugar a longitudes de onda inferiores a los 150 nm, no observables por tanto en espectrofotómetros convencionales. Esta característica permite utilizarlos como disolventes de la muestar a anlizar, ya que no interfieren con sus señales.

Alquenos y alquinos. Presentan bandas de absorción debidas a las transiciones π→π del triple enlace C-C. Esta transición es de menor energía que en el caso de los alcanos y aparece a longitudes de onda mayores (alquenos:175 nm; alquinos: 170 nm). El doble y triple enlace son los grupos cromóforos de estas moléculas.

Éteres, tioles, sulfuros, aminas: En este caso el grupo cromóforo está formado por el heteroátomo (O,S,N) y los átomos que le enlazan. El heteroátomo presenta pares libres y la transición que produce la absorción es n→σ. Esta banda de absorción aparece sobre 175-200 nm para alcoholes, éteres y aminas, desplazándose a 200-220 nm para los sulfuro.

Aldehídos, cetonas, ácidos y derivados. El grupo cromóforo de estos compuestos es el carbonilo (C=O). Dado que el oxígeno posee pares libres, la transición de menor energía es la n→π, pero es una transición prohibida (ϵmax=15), al no existir solapamiento entre los orbitales implicados. La siguiente transición de menor energía es la π→π, observable a λmax=188nm, con absortividad molar de 900.

En la siguiente tabla se indican las absorciones de los principales grupos cromóforos.

absorcion-compuestos-01



Deben estudiarlo para el día martes

Rafael Troche
Docente Análisis Instrumental











QUÍMICA Y COLOR

EL COLOR


El mundo que conocemos se ve muy bien a colores. A todos nos gusta contemplar los campos verdes, el cielo azul o las flores de diferentes colores. Pero no solo la naturaleza es colorida. Nos gustan tanto los colores que los queremos capturar en nuestros objetos; deseamos pintar nuestras casas, teñir nuestra ropa, imprimir fotografías brillantes, tener una televisión a colores, comer alimentos de buen color.

El estudio de los colores ha sido muy profundo, sin embargo, como en cualquier área de las ciencias, siempre queda algo por hacer.

¿ Que es la Luz?

La luz visible para nosotros una parte muy pequeña del espectro electromagnético. La luz, un fenómeno complejo, está compuesto de fotones (del griego, φοος, luz) que tienen propiedades mecánico-ondulatorias, esto es: una propiedad de onda (como la de las olas en el mar) y una propiedad de partícula (como una canica diminuta), que llevan una energía definida.
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Los diferentes tipos de radiaciones se dividen según su longitud de onda y son: ondas de radio (1Mm-30cm), microondas (30cm-1mm), infrarrojo (1mm-700nm), espectro visible (700nm-400nm), ultravioleta (400nm-10nm), rayos X (10nm-10pm), rayos gamma (γ, 10pm-1pm) y rayos cósmicos (1pm-1fm).

Resultado de imagen de onda electromagnetica luz 

Es así que la longitud de onda se relaciona de manera inversamente proporcional con la energía.

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Descomposición de la luz blanca.

Hay varias formas de producir colores: puede sr por descomposición de la luz blanca, por absorción de luz o por emisión de luz. En el primer caso no es muy importante con que sustancia esté interactuando la luz, pero en los dos últimos casos sí importa mucho la estructura atómica y molecular de la sustancia. ¿Porqué el cielo es azul? No es porque refleje el color del mar, sino por dispersión de la parte azul de la luz. Esto es provocado por un fenómeno llamado dispersión de Raleigh, que se manifiesta cuando una onda interactúa con una partícula que es menor de un décimo de su longitud de onda, es decir, al llegar a la luz del Sol a la Tierra, choca con las moléculas del aire de nuestra atmósfera, que son principalmente oxígeno (O2) y nitrógeno (N2); estas moléculas dispersan la luz azul con más fuerza y, en lugar de seguir su camino, se desvía y llega a nuestros ojos.

Absorción de luz.

Una sustancia puede absorber radiación si su energía corresponde exactamente a la necesaria para que suba a un nivel de mayor energía. Los fotones de la luz visible generalmente tienen la energía suficiente para que los electrones de una sustancia suban a un nivel más energético. Pero un electrón en un átomo o una molécula no tiene permitido absorber cualquier cantidad de energía. Como los fotones de luz de cada color tienen diferente energía, una sustancia puede absorber unos colores y otros no. Pensemos en una hoja de un árbol que todavía este verde: recibe luz blanca y nosotros la vemos verde. Esto significa que está llegando luz verde desde la hoja hasta nuestros ojos, pero la luz blanca es una mezcla de todos los colores, ¿qué les pasó a los demás colores si solo vemos el verde? La respuesta es que fueron absorbidos por la hoja; el verde no se absorbe y se refleja a nuestros ojos.

En el caso de las plantas, conocemos las estructuras de las moléculas más comunes que les dan color. Por ejemplo, el color verde es debido a la clorofila; algunos rojos y la mayor parte de los tonos de naranjado y amarillo se deben a moléculas conocidas como carotenoides, y muchos tonos del rojo, azul y morado son causados por las antocianinas.

Las plantas verdes deben su color a la gran cantidad de clorofila que tienen en sus hojas o tallos. Esta molécula es la encargada de absorber la luz que servirá como fuente de energía durante el proceso de fotosíntesis. Una parte muy importante en la estructura de la clorofila es el átomo central de magnesio (Mg), que le brinda muchas de sus propiedades y sin el cual no sería capaz de cumplir su función.

Los carotenoides están presentes en muchas frutas y verduras. Hay más de 700 carotenoides en la naturaleza y uno de los más conocidos es el beta-caroteno, la fuente de la vitamina A y una de las moléculas que le dan color a la zanahoria, el melón, el mango, pero también se encuentra en las espinacas y el brócoli. Nuestro cuerpo necesita vitamina A para fabricar el retinal que formará a la rodopsina que es indispensable en la percepción de la luz. Esa es una de las muchas buenas razones para consumir frutas y verduras.

Las antocianinas se encuentran, principalmente, en las flores y los frutos a los que imparten un amplio rango de colores. Hay más de 300 moléculas en este grupo. La col morada tiene muchos compuestos a los cuales debe su color tan intenso, básicamente antocianinas. Cuando estas antocianinas se someten a un cambio de pH cambian de color. Este cambio es provocado por una pequeña modificación en la estructura de la antocianina. Un ácido puede ceder un átomo de hidrógeno a la antocianina y una base puede quitarle uno; estas reacciones cambian su distribución de electrones y provocan un cambio de color. Muchos otros compuestos son capaces de cambiar de color al variar la concentración de hidrogeniones en la solución y se usan en química como indicadores.

¿A qué se debe el color rojo de la sangre? En nuestra sangre circulan muchas células conocidas como eritrocitos o glóbulos rojos, en los que hay una molécula muy grande que se encarga de transportar el oxígeno desde nuestros pulmones hasta todos los rincones de nuestro cuerpo: la hemoglobina. La hemoglobina es una proteína que tiene en su interior un fragmento conocido como grupo hemo, que es el causante de su color rojo, el cual tiene un átomo de hierro (Fe) en el centro del anillo de protoporfirina IX, encargado de unirse a la molécula de oxígeno. Si compramos la estructura de la clorofila con la del grupo hemo, notaremos un enorme parecido. El hecho de que una sea verde y el otro rojo se debe, principalmente al cambio de metal en el centro de la estructura.

Para los textiles se utilizaban tintes extraídos de plantas como el índigo, que da un tinte azul, o el palo de Brasil, para teñir de color rojo; otros eran extraídos de insectos, como el carmín, que es un colorante rojo extraído de la cochinilla del nopal, y el púrpura, un tinte extremadamente codiciado, usado solamente por la realeza y el clero, que era extraído de algunas especies de caracoles. Estas sustancias son compuestos orgánicos que no eran accesibles al público en general ya que su extracción era costosa. Hoy el mercado de los colorantes está dominado por los compuestos orgánicos sintéticos. La industria química ha desarrollado una amplia variedad de compuestos para usos muy específicos. Los más importantes son los tintes azo (caracterizados por tener dos nitrógenos unidos N=N), que corresponden a 60 ó 70% de los tintes utilizados en textiles; los tintes de carbonilo (caracterizados por tener un grupo carbonilo C=O), que son segundos en importancia y se adhieren mejor a textiles de algodón; las ftalocianinas (con estructura parecida a la clorofila o el grupo hemo), que son moléculas muy útiles para hacer tintas con colores intensos y duraderos, entre otros. Algunos compuestos inorgánicos son utilizados todavía y no difieren mucho de los usados desde hace cientos o miles de años, como los óxidos de hierro (FeO (OH), Fe2O3, Fe3O4), del cromato de plomo (PbCrO4) el sulfuro de cadmio (CdS), el ultramarino (Na8-10Al6Si6O24S2-4), el negro de humo, que es simplemente carbón y el azul de Prusia (Fe4 [Fe (CN)6]3), por mencionar los más importantes.


LAS TRANSICIONES ELECTRÓNICAS

Los átomos absorben luz de una longitud de onda pero inmediatamente liberan esta energía en forma de luz de otra longitud distinta. Esto es conocido como fluorescencia, y ocurre cuando un electrón toma energía, pasa a una órbita más elevada y luego cae otra vez en varios saltos. Muchas sustancias producen fluorescencia cuando la luz ultravioleta incide sobre ellas. No vemos el ultravioleta, pero podemos observar la energía de bajo nivel que produce.

La cantidad de luz absorbida es proporcional al producto de la concentración, la longitud de paso óptico y el coeficiente de absortividad molar, que es la conocida ley de Lambert-Beer-Bouguer. La absortividad molar (ε) de un compuesto es una constante característica de ese compuesto a determinada longitud de onda. Como la absorbancia es proporcional a la concentración, se puede determinar la concentración de una disolución si se conocen la absorbancia y la absortividad molar a determinada longitud de onda. De ahí la importancia de esta ley, además de que nos muestra la interacción entre la materia y la energía en forma luminosa.


Efecto de la conjugación sobre la λmáx.

Mientras más enlaces dobles conjugados tenga un compuesto, la longitud de onda en la que suceden las transiciones n→π* y π→π* será mayor. Por ejemplo, la transición n→π* de la metilvinilcetona está a 324nm, y la transición π→π* está a 219 nm. Ambos valores son de longitudes de onda mayores que los correspondientes a las λmáx de la acetona porque la metilvinilcetona cuenta con dos enlaces dobles conjugados, mientras que la acetona solo tiene un enlace doble. La λmáx y la absortividad molar aumentan cuando aumenta la cantidad de enlaces dobles conjugados. Así, con la λmáx de un compuesto se puede estimar la cantidad de enlaces dobles conjugados que tiene el compuesto. Si un compuesto tiene los enlaces dobles suficientes absorberá luz visible y el compuesto tendrá color. Con esto en mente, el β-caroteno es una sustancia anaranjada y el licopeno, que se encuentra en jitomates, sandias y uvas rosadas es rojo.

Emisión de luz.

Veamos por último, la producción de colores por emisión de luz. Hay cosas que emiten luz colorida, como las lámparas de alumbrado público que emiten luz amarilla, los láseres o los LEDs de los semáforos modernos. En estos casos no hay absorción de luz de un color, simplemente se producen ciertos colores. El fuego es una reacción química muy vigorosa, es una oxidación muy rápida. En esta reacción se desprende mucha energía en forma de luz y calor. Hay reacciones de combustión que producen mucha luz, como es el caso de la combustión del magnesio metálico. La luz es tan intensa que es difícil mirar a la llama directamente sin lastimarse los ojos. Pero esta luz es casi de color blanco.

Los fuegos pirotécnicos son un espectáculo muy usado en ocasiones especiales. Es común celebrar la noche del 15 de septiembre con un castillo en el cual hay luces multicolores y tal vez hasta una bandera de México que se ilumina con la pólvora ardiente. Para lograrlo, se utilizan compuestos metálicos que se añaden a la pólvora y que, al arder, brillarán de un color en particular. Si se ponen sales metálicas en una llama, cada metal brillará con su color particular.

Es notorio el color tan característico e intenso que imparte el sodio a una llama. Cualquiera que haya cocinado, habrá visto que la sal de cocina (cloruro de sodio, NaCl) vuelve a la llama de color amarillo-naranja. Sí este color se parece al de las lámparas de alumbrado público no es una coincidencia. En el interior de estas lámparas se encuentra un poco de sodio metálico, que con el vapor se evapora fácilmente y brilla con gran intensidad. Estas lámparas son por mucho más efectivas en cuanto a producción de luz se refiere y su número es tan abundante en algunas ciudades que cuando está nublado de noche, las nubes presentan un ligero color naranja, que no es más que el reflejo de la luz producida por ellas.

Deben repasarlo para el día martes

Rafael Troche
Docente Análisis Instrumental










domingo, 27 de agosto de 2017

REFRACTOMETRÍA




Refractometría 


Es una técnica analítica que consiste en la medida del índice de refracción de un líquido con objeto de investigar su composición si se trata de una disolución o de su pureza si es un compuesto único. Poco han variado los refractómetros desde el diseño original de Abbé (1874) y Pulfrich(1887). Un rayo de luz que pasa oblicuamente desde un medio hacia otro de diferente densidad, cambia su dirección cuando traspasa la superficie. Este cambio en la dirección se denomina refracción.

Cuando el segundo medio es más denso que el primero, el rayo se aproxima a la perpendicular trazada sobre la superficie divisoria en el punto de incidencia. La causa fundamental de este cambio en la dirección se debe al cambio en la velocidad de la luz que se hace más lenta cuanto más denso sea el medio por el que pasa el haz.

Se denomina refractometría, al método óptico de determinar la velocidad de propagación de la luz en un medio/compuesto/substancia/cuerpo, la cual se relaciona directamente con la densidad de este medio/compuesto/substancia/cuerpo. Para emplear este principio se utiliza la refracción de la luz, ((la cual es unapropiedad física fundamental de cualquier sustancia), y la escala de medición de este principio se llama índice de refracción, Los refractómetros son los instrumentos que emplean este principio de refracción ya sea el de refracción, (empleando varios prismas), o el de angulo critico, (empleando solo un prisma), y su escala primaria de medición es elíndice de refracción, a partir de la cual se construyen las diferentes escalas específicas, Brix (azúcar), Densidad Específica, % sal, etc. Los refractómetros se utilizan para medir en líquidos, sólidos y gases, como vidrios o gemas.



         
REFRACTÓMETRO

Material de Apoyo:
  1. http://equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=3344
  2. https://laboratoriosuperior.files.wordpress.com/2015/10/tema-8a-refractometrc3ada.pdf
  3. https://www.youtube.com/watch?v=4mqY1sOfW4E




Rafael Troche 
Docente Análisis Instrumental











MÉTODOS ÓPTICOS DE ANÁLISIS- LA REM


INTERACCIÓN DE LA REM CON LA MATERIA



Una vez que hemos descrito la luz como una onda electromagnética, en este tema abordaremos la interacción de una haz de radiación electromagnética con la materia. Algunos de los fenómenos más importantes a los que da lugar tal interacción son: 

· Esparcimiento de la radiación 
· Reflexión y Refracción 
· Absorción 

La idea general para describir estos fenómenos descansa en la interacción de los campos eléctrico y magnético asociados a la onda con las cargas de los átomos que componen el medio material. La materia está compuesta de átomos o moléculas en diferentes estados de agregación dependiendo de los enlaces entre dichas átomos moléculas. En el estado sólido las distancias interatómicas son muy pequeñas, del orden de 0.1 nm, con densidades elevadas, del orden de 1015-17 átomos/m3. Por el contrario en gases a baja presión, los átomos o moléculas interaccionan poco entre sí y mantienen distancias grandes, del orden de varias micras. El efecto de una onda electromagnética sobre un medio material dependerá mucho de su estado de agregación, como veremos adelante. 

Por un lado, sabemos que el haz de radiación consiste en un campo electromagnético variable en el tiempo. Por lo tanto, este campo actuará sobre las cargas de cada átomo del medio material. Es decir, la interacción de una onda electromagnética sobre la materia se reduce a la acción de los campos sobre las cargas del medio material.

               
















Rafael Troche
Docente Análisis Instrumental














INTRODUCCIÓN A LA METEOROLOGÍA QUÍMICA-CURVAS DE CALIBRACIÓN EN LOS MÉTODOS ANALÍTICOS



CURVAS DE CALIBRACIÓN EN LOS MÉTODOS ANALÍTICOS



Un procedimiento analítico muy utilizado en análisis cuantitativo es el llamado de calibración que implica la construcción de una “curva de calibración”. Una curva de calibración es la representación gráfica de una señal que se mide en función de la concentración de un analito. La calibración incluye la selección de un modelo para estimar los parámetros que permitan determinar la linealidad de esa curva. y, en consecuencia, la capacidad de un método analítico para obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de un compuesto en una muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo. En el procedimiento se compara una propiedad del analito con la de estándares de concentración conocida del mismo analito (o de algún otro con propiedades muy similares a éste). Para realizar la comparación se requiere utilizar métodos y equipos apropiados para la resolución del problema de acuerdo al analito que se desee determinar.

La etapa de calibración analítica se realiza mediante un modelo de línea recta que consiste en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste a una serie de “n” puntos experimentales, donde cada punto se encuentra definido por una variable “x” (variable independiente, generalmente concentración del analito de interés) y una variable “y” (variable dependiente, generalmente respuesta instrumental). 

La recta de calibrado se encuentra definida por una ordenada al origen (b) y una pendiente (m), mediante la ecuación y = mx + b . A partir de la curva de calibración (conjunto de concentraciones que describen el intervalo en el cual se deberá cuantificar el compuesto por analizar) y a fin de asegurar que la recta encontrada con los puntos experimentales se ajuste correctamente al modelo matemático de la ecuación se calculan los valores de la ordenada al origen, la pendiente y el coeficiente de determinación (r2 ). 

Por tener una buena exactitud y confiabilidad estadística, el método más empleado para encontrar los parámetros de la curva de calibrado es el método de los mínimos cuadrados Este método busca la recta del calibrado que haga que la suma de los cuadrados de las distancias verticales entre cada punto experimental y la recta de calibrado sea mínima o tienda a cero. A la distancia vertical entre cada punto experimental y la recta de calibrado se le conoce como residual.

En forma gráfica se representa como:


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Material de Apoyo

Rafael Troche
Docente Análisis Instrumental






















domingo, 6 de agosto de 2017

PRÁCTICA DE LABORATORIO 1

BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO (BPL)
(Good Laboratory Practice)

Definición.- "Es un conjunto de reglas, de procedimientos operacionales y prácticas establecidas y promulgadas por determinados organismos como la (Organization for Economic Cooperation and Development (OCDE), o la Food and Drug Administration (FDA), etc.), que se consideran de obligado cumplimiento para asegurar la calidad e integridad de los datos producidos en el trabajo diario de laboratorio.

Esto surge debido a que a Fines de los años 1969 y 1975 las agencias reguladoras se enfrentaron con grandes discrepancias en los datos dirigidos a ellas, obtenidos en distintos laboratorios.

Había caso de laboratorios que no operaban con protocolos y la información sólo estaba en forma oral, en general los informes eran incompletos y no contaban con documentos de procedimientos estandarizados.

Las BPL abarcan todos los eslabones de un estudio o investigación, y para ello se precisa que previamente se haya establecido un "Plan de Garantía de la Calidad". Para verificar que el Plan se cumple a lo largo de todo el estudio, se precisa de "un sistema planificado de actividades", cuyo diseño o finalidad es asegurar que el Plan de Garantía se cumple.Se incluyen las dos definiciones más usuales de BPL:

OCDE: "Las BPL es todo lo relacionado con el proceso de organización y las condiciones técnicas bajo las cuales los estudios de laboratorio se han planificado, realizado, controlado, registrado e informado".

AOAC: "Las BPL son un conjunto de reglas, procedimientos operativos y prácticos establecidas por una determinada organización para asegurar la calidad y la rectitud de los resultados generados por un laboratorio".

Las normas BPL constituyen, en esencia, una filosofía de trabajo, son un sistema de organización de todo lo que de alguna forma interviene en la realización de un estudio o procedimiento encaminado a la investigación de todo producto químico o biológico que pueda tener impacto sobre la especie humana. Las normas inciden en cómo debe trabajar a lo largo de todo el estudio, desde su diseño hasta el archivo.

Principios  que abarcan las BPL. Basado en las descripciones de Goldman son:

1. Facilidades Adecuadas. Desde el punto de vista del trabajo, para que éste pueda ser realizado por los trabajadores en forma segura y apropiada. Se debe contar con suficientes salas, para que el personal trabaje sin limitaciones de espacio. El propósito y el tipo de producto a analizar deben ser considerados en el diseño de un laboratorio.

2. Personal Cualificado. Es importante contar con personal cualificado. Esto es una decisión de manejo basada en trabajo de calidad.

3.Equipamientos Mantenidos y Calibrados. Emplear equipos mantenidos y calibrados de manera apropiada. Además disponer de los registros de los mantenimientos.

4.Procedimientos Operativos Estánadares (POEs). Procedimientos operacionales estándares escritos. Ellos aseguran que cada uno obedezca al único procedimiento al mismo tiempo, porque no es lo mismo dar las indicaciones en forma oral, o decir que se sigan las indicaciones que aparecen en alguna literatura, donde muchas veces la traducción no es la más adecuada, que si están establecidas por escrito. Es importante esta práctica, tanto para las operaciones de muestreo como en las del procedimiento analítico, porque es una manera de asegurar que la muestra, está en condiciones para el análisis. Se debe considerar que: sólo lo que está escrito existe.

A continuación se mencionan algunos de los procedimientos estándares de operaciones, (POEs). Se debe poner atención que siempre los procedimientos e instrucciones deben estar explícitamente indicadas.
  • Anotar los datos y observaciones en un cuaderno, no en papeles sueltos.
  • Asegurar que muestras, estándares y reactivos han sido etiquetados.
  • Siempre usar material de vidrio limpio.
  • Nunca calentar el material calibrado de vidrio.
  • Usar reactivos para análisis, a menos que se estipule lo contrario. y que todos los reactivos contengan garantía de sus límites máximos de impurezas.
  • Tener cuidado de no contaminar estándares, muestras y reactivos.
  • Hacer muestras en duplicado. como análisis, cuando sea posible.
  • Evaluar críticamente todas las mediciones y reacciones si algo está sospechoso.
  • Usar los métodos estándares para evaluar datos cuantificados.
Garantía de calidad, conceptos y operaciones.El chequeo rutinario debe ser realizado por una persona cualificada e independiente. Es uno de los conceptos más importantes en las BPLs.

La unidad de aseguramiento de calidad tiene la doble responsabilidad de comprobar los procedimientos y resultados y de asegurar que el manejo del trabajo está siendo conducido apropiadamente. Para decidir, que haya un alto grado de aseguramiento y que los resultados obtenidos son fiables.

La Unidad de Aseguramiento de Calidad es la herramienta disponible más usada para asegurar que el informe es fiable. Esta tiene un denominador común en el cual se puede comparar y contrastar las facilidades y el manejo.

En muchas ocasiones se confunde la Garantía de Calidad (GC) con el Control de Calidad (CC). El CC son una serie de ensayos, análisis o medidas que se realizan sobre el producto acabado para ver si cumple con la calidad especificada. Asimismo se engloba dentro del control de calidad, todo aquello destinado a verificar que la calidad de las materias primas es la correcta, según acuerdo o normas. y que las operaciones del proceso de fabricación van dando resultados correctos. En la elaboración de un producto, el control de calidad comprende un programa de operaciones analíticas o de verificación.

En el caso de un laboratorio de análisis el control de calidad se centrará sobre el dato analítico -el producto que elabora- y por lo tanto. estará integrado por todas las operaciones matemáticas para evaluar la precisión y la exactitud de los análisis generados, así como las clásicas operaciones de control de calidad con muestras de valor conocido en programas intra e interlaboratorios.

La GC es algo mucho más amplio. Podría definirse como: "La creación y aplicación de un sistema que garantiza y demuestra que los métodos y medios empleados en todas las etapas de un análisis, estudio o investigación se han realizado cumpliendo las BPL".Por lo tanto, la GC es un sistema que debe dar garantías del "cómo" se han realizado todas las operaciones técnicas y administrativas alrededor de un análisis o estudio.

Protocolo e InformeCada estudio tiene que usar su propio protocolo. pero el formato de éste debe ser establecido bajo una norma. Este protocolo debe ser conservado y cambiar sólo unas pocas palabras para aludir a la técnica empleada, y será registrado con un número de procedimiento estándar.

Inspecciones de cumplimientoOtra pregunta que merece atención para garantizar la calidad. ¿Con que frecuencia deben ser estudiados o inspeccionados los estudios en el laboratorio?En el pasado se ha tratado de hacerlo cada dos años, pero aún no se puede asegurar como puede ser cubierto.Estas responsabilidades deben ser ejecutadas por la dirección por definición en programas implementados, incluyendo el establecimiento de un programa de aseguramiento de calidad que garantice todos los estudios que fijan el manejo o se conducen con las Buenas Prácticas de Laboratorio.

Gestión: significa determinar el número de personal requerido para realizar un adecuado programa de análisis. Un buen manejo debería determinar el número de personas requerido para realizar un programa de análisis, además que contemple un sistema de calificación y asegure el entrenamiento necesario para el personal,
Ofrecer cursos y mantener a la gente informada es indispensable, porque el elemento humano, según Bennett (6) es un factor vital en todo programa de aseguramiento de calidad.

Por lo tanto se requiere de esfuerzos conjuntos para un programa exitoso, donde es más necesaria la cooperación, que la imposición o el mandato.

La Implementación exitosa de las Buenas Prácticas de Laboratorio: requiere regulación y reconocimiento del rol del elemento humano, en todos los niveles de personal, en el diseño, implementación y evaluación de un Programa de Aseguramiento de Calidad.
Muchas veces el Bioquímico es el primer responsable del proceso analítico, en el cual se aplican las Buenas Prácticas de Laboratorio. Pero a menudo no es mirado ni considerado en el desarrollo e implementación de un Programa de Aseguramiento de Calidad. Por lo tanto es deseable diseñar el programa en el que tenga una participación decisiva.

La importancia de la comunicaciónEl personal de aseguramiento de la calidad, la dirección y el personal de trabajo del laboratorio, deben trabajar en conjuntos para resolver los problemas y tomar decisiones correctivas de común acuerdo.

La resolución de un problema de Aseguramiento de Calidad sigue estas interacciones básicas: definir exactamente el problema, generar las posibles soluciones, evaluación de éstas, decisión mutua de aceptarlas e implementarlas y finalmente evaluación de la solución.

El resolver el problema aproxima a reconocer la importancia de la interacción de todos los miembros de la organización.

Integración de Programa de Aseguramiento de Calidad en Laboratorio AnalíticoLa clave para el cumplimiento de la BPLs en el laboratorio es la integración del concepto de Aseguramiento de Calidad.

Está ejecutado en las fases bajo la dirección de la Unidad de Aseguramiento de Calidad.La primera, fase de Manejo, donde el plan básico es formulado en base a control decidido por la dirección. La selección de una persona apropiada para dirigir el proyecto podría ser el más importante paso para realizarlo.

En la segunda fase, donde se prepara al laboratorio para la implementación final. Ésta es la fase de adecuación en la cual los miembros de la Unidad de Aseguramiento de Calidad y el personal del laboratorio debe colaborar completamente.

Algunas tareas que deben ser atendidas en esta fase.
  • Revisión y escritura de POEs incluyendo mantenimiento de equipos, aseguramiento de la calidad, preparación de informes y preparación apropiada de protocolos.
  • Implementación de procedimientos formales, con un entrenamiento, ayuda educacional con documentos, para cada empleado.
  • Preparación y puesta al día de la descripción de trabajo y currículum vitae.
  • Establecimiento de archivos apropiados.
  • Establecimiento de un programa de etiquetado de reactivos.
  • Establecimiento de procedimientos de inspecciones reguladas.
  • Validación de sistemas computacionales.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

(1) MORRIS, C.R., Good Laboratory Practices; An Agrochemical Perspective, Garner, W. Y. (Ed) at the Meeting of the American Chemical Society, New Orleans, Louisiana, Good Laboratory Practices: Birth of a New Profession, pp. 1-6.

 (2) GOLDMAN D.S., Good Laboratory Practices: An Agrochemical Perspective, Garner, W. Y(Ed) at the 194th Meeting of the American Chemical Society, New Orleans, Louisiana, Chemical Aspects of Compliance with Good Laboratory Practices, EPA Perspective on Generic Good Laboratory Practice, pp. l3~23.

(3) RAPPAPORT. A. E. et al (1977) Quality Assurance Practices for Health Laboratories, Inhorn, S.L. (Ed). American Public Health Association, Washington, DC. Laboratory Facilities and Services. pp. 173-208.

(4) BLOOM, H. M~, Optimizing Chemical Laboratory Performance trough the Application of Quality Assurance PrincipIes, Garfield, F. M. Et al(Ed.) Association of Official Analytical Chemists, Arlington VA, Pertinent Criteria and Guidance Concerning Design of Chemical Laboratories, pp 29-42

(5) Safety in Academic Chemistry Laboratories (1979) 3rd Ed., Committee on Chemical Safety, American Chemical Society. Washington D.C.

(6) Federal Register (December 22 1978) Non-Clinical Laboratory Studies, Good Laboratories Practice Regulations. Part 58, p. 60013 (7) Bennett, G., Evans, J. and Roadcap N., (1987) Good Laboratory Practices: An Agrochemical Perspective. Garner, W.Y., (Ed.) at the l49th Meeting of the American Chemical Society, New Orleans, Louisiana, The Human Element of Quality Assurance, PP. 27-34.

Material de Apoyo:

http://w1.iata.csic.es/IATA/segl/Riesgos/BUENAS%20PRACTICAS%20DE%20LABORATORIO.pdf
http://csh.cimav.edu.mx/presentacion2.pdf